全身microRNA-21基因敲除小鼠的繁育和鉴定
唐睿, 何兴, 潘卫庆, 郑葵阳
目的 利用Cre/loxp基因敲除技术制备全身microRNA-21(miR-21)基因敲除小鼠,并进行鉴定,为进一步在整体动物水平研究宿主miR-21在血吸虫感染后发挥的调控作用提供研究平台。方法 将引进的miR-21flox/flox小鼠和全身表达Cre重组酶的小鼠分别进行繁殖和鉴定,两种小鼠进行杂交,对其子代小鼠(F1)的基因型进行鉴定;将基因型为miR-21flox/-Cre的F1小鼠与亲代miR-21flox/flox小鼠进行杂交,对其子代小鼠(F2)的基因型进行鉴定。结果 共繁殖亲代miR-21flox/flox小鼠20只,经鉴定均为miR-21 flox纯合子小鼠,繁殖表达Cre重组酶的亲代小鼠17只。亲代小鼠杂交并繁殖,得到基因型为miR-21flox/-Cre的F1小鼠10只。将miR-21flox/-Cre的F1小鼠与亲代miR-21flox/flox小鼠杂交并繁殖,得基因型为miR-21flox/floxCre或miR-21flox/-Cre的F2小鼠,miR-21flox/floxCre小鼠即为本实验所需要构建的全身miR-21基因敲除小鼠。这种基因敲除小鼠与正常小鼠身长、体重无明显差异。结论 本研究利用Cre/loxp技术成功繁育出全身miR-21基因敲除小鼠。