MDCK细胞缺氧模型的建立及机制研究
秦霞, 宋英, 张洋, 武静茹, 张咏梅
目的 建立犬肾细胞(Madin-Darby canine kidney, MDCK)缺氧模型,进一步探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)在缺氧性细胞损伤中的活性改变。方法 将MDCK细胞置于体积分数为5%CO2和95%N2的有机玻璃调节性密闭容器中分别培养24、36、48、72、84 h, MTT实验检测细胞的存活力,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JNK(c-Jun NH2 terminal protein kinase)和p38 MAPK的磷酸化活性。结果 MDCK细胞缺氧24、36、48、72、84 h后,与正常对照组相比,MTT D值均明显下降(P<0.01)。MDCK细胞缺氧后,JNK和p38 MAPK的磷酸化水平增高。结论 此方法可以成功建立操作简便、有效的MDCK细胞缺氧模型,且是通过激活JNK、p38 MAPK引起缺氧性细胞损伤。
:徐州医学院学报