目的 建立犬肾细胞（Madin-Darby canine kidney, MDCK）缺氧模型，进一步探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）在缺氧性细胞损伤中的活性改变。方法 将MDCK细胞置于体积分数为5%CO2和95%N2的有机玻璃调节性密闭容器中分别培养24、36、48、72、84 h, MTT实验检测细胞的存活力，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测JNK（c-Jun NH2 terminal protein kinase）和p38 MAPK的磷酸化活性。结果 MDCK细胞缺氧24、36、48、72、84 h后，与正常对照组相比，MTT D值均明显下降（P＜0.01）。MDCK细胞缺氧后，JNK和p38 MAPK的磷酸化水平增高。结论 此方法可以成功建立操作简便、有效的MDCK细胞缺氧模型，且是通过激活JNK、p38 MAPK引起缺氧性细胞损伤。