流式细胞术检测小鼠肝脏中嗜酸性粒细胞方法的建立
于倩, 李向阳, 马锐, 颜超, 汤仁仙, 郑葵阳
目的 建立稳定的流式细胞术检测小鼠肝脏组织浸润嗜酸性粒细胞的方法。方法 华支睾吸虫感染4周小鼠及正常小鼠肝脏原位灌注后,制备肝组织单细胞悬液,Procell密度梯度离心获得肝脏白细胞;采用多色流式细胞术,前向角散射(FSC)、侧向角散射(SSC)及CD45等参数圈门,利用抗Gr-1、Siglec-F等分子的流式抗体对其中的嗜酸性粒细胞进行标记、检测分析。结果 正常肝脏白细胞流式检测显示在前散射中等位置(FSCmid)、侧散较高处(SSChig)有一群细胞,表型多为CD45+CD3-CD19-;华支睾吸虫感染后该群细胞比例明显增高,该群细胞不表达MHCⅡ类分子(MHCⅡ-),低表达Gr1(Gr1low),表达Siglec F(Siglec F+)。结论 流式细胞术检测CD45+FSCmidSSChigGr1lowSiglec F+细胞是一种稳定的检测及分析肝脏嗜酸性粒细胞数量及功能的方法。
:徐州医学院学报