目的 构建人缺失型Midkine（tMK）的原核表达载体,以得到具有生物学活性的重组蛋白。方法 从测序正确的pMD18-T-tmk Vector重组质粒上切下tmk序列,重组至pET30（a+）载体中,转化BL21（DE3）,IPTG诱导蛋白表达,Heparin Sepharose 4B纯化蛋白,CCK-8检测其促NIH3T3和BGC823细胞增殖的活性。结果 成功构建了tMK的原核表达载体,纯化得到重组tMK蛋白。该蛋白在0.031 25～0.5 mg/L范围时能明显促进NIH3T3细胞增殖（P＜0.05或P＜0.01）,在0.062 5～2 mg/L范围时能明显促进BGC823细胞增殖（P＜0.05）。结论 获得了具有生物学活性的重组tMK蛋白。